- 解決方案ADC藥物的研究沒有固定的研究方案，由于偶聯(lián)方式、藥物結(jié)構(gòu)的差異化，每個(gè)ADC藥物的臨床前研究都存在著不同的挑戰(zhàn)和難題。美迪西在ADC的臨床前一體化研究方案制定中與客戶深入交流，科研骨干將每一個(gè)案例的特點(diǎn)與多年實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)積累相結(jié)合，謹(jǐn)慎地將優(yōu)質(zhì)實(shí)驗(yàn)方案與結(jié)果提交到客戶手上。
截至2022年底，美迪西承接的IND申報(bào)類生物藥大項(xiàng)目已經(jīng)100多項(xiàng)，包括單抗、雙抗、多抗、ADC、病毒疫苗和融合蛋白等。 截至2024年6月底，美迪西已成功助力28個(gè)ADC藥物獲批臨床，并有20多個(gè)ADC項(xiàng)目在研。Payload (50+)：DX8951f, SN-38, DM1, DM4, Exatecan, Dxd, MMAE/MMAF, Tubulysin M, PBD dimer, Seco-Duocarmycin MA, PNU159682, Doxorubicin analog等；Linker (200+): 具有多種Cleavable和uncleavable、親水性和疏水性以及新型Linker，如：Gly-Gly-Phe-Gly,VC-PAB, SMCC, N-SMP等；Payload+Linker (30+): SN-38-PEG-PAB, DXD-GlyGlyPheGly, DXD-VCPABDM1-SMCC, DM1-SPP, DM4-SPDB, MC-VC-PAB-MMAE/MMAF, MC-Val-Ala-PBD, VC-PAB-Dolastatin 10等；美迪西已完成毒素小分子：DM1，MMAE、Exatecan、Dxd，SN38等；美迪西已完成靶點(diǎn)：Her2、Her3、Trop2、Claudin 18.2、CD33、Muc1、FR等；美迪西有著開發(fā)并驗(yàn)證針對不同靶點(diǎn)分析方法的豐富經(jīng)驗(yàn)，能夠有效根據(jù)需求分析靶點(diǎn)的表達(dá)水平、以及靶點(diǎn)可及性，為靶點(diǎn)的選擇提供建設(shè)性意見。
- ADC Payloads 合成美迪西的化合物庫中有多種不同作用機(jī)制的化學(xué)ADC payload分子供客戶備選，同時(shí)可以定制合成客戶所特定需要的一種或幾種ADC抗腫瘤化學(xué)藥物。美迪西的ADC payloads分子庫可以有效解決細(xì)胞毒素的選擇難題，在ADC payloads分子庫中有美迪西藥物發(fā)現(xiàn)團(tuán)隊(duì)積累了多種不同作用機(jī)制、不同種類的細(xì)胞毒素可供客戶選擇，同時(shí)可以定制合成客戶所需要的一種或幾種ADC細(xì)胞毒素，滿足數(shù)量上的需求。通過自研和對外合作，美迪西可以提供所有已經(jīng)上市ADC藥物的6種毒素可以提供已經(jīng)上市ADC中毒素的衍生物達(dá)20種以上可以合成自研類毒素。微管蛋白抑制劑/穩(wěn)定性破壞劑DNA合成抑制劑拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑和RNA聚合酶II抑制劑
- ADC偶聯(lián)策略ADC 的三個(gè)主要組成部分是抗體 (Antibody)、連接子 (Linker) 和有效載荷 （Payload）。抗體負(fù)責(zé)靶向結(jié)合，可以是單克隆抗體、Fab抗體、雙特異性抗體或納米抗體。連接子連接抗體和payload。分為可切割和不可切割兩種類型。連接子是ADC穩(wěn)定性的關(guān)鍵，負(fù)責(zé)何時(shí)釋放有效載荷。Payload通常是一種具有明確作用機(jī)制的高活性毒素分子。對腫瘤細(xì)胞具有一定的殺傷作用。
基于半胱氨酸的ADC偶聯(lián)提供5 mg、50 mg、500 mg等抗體量級的偶聯(lián)服務(wù)，實(shí)驗(yàn)周期：2-4周。QC方法包括SEC、HIC、LC-MS/MS等。DAR值≈4。提供其它偶聯(lián)方法的開發(fā)服務(wù)。 - ADC藥物體外研究美迪西擁有300種以上的腫瘤細(xì)胞系，多種可供選擇的ADC靶蛋白表達(dá)陽性和陰性的腫瘤細(xì)胞。并且提供靶點(diǎn)過表達(dá)細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù)，可以為客戶提供多種已知靶點(diǎn)的旁觀者效應(yīng)分析服務(wù)。此外，美迪西生物團(tuán)隊(duì)擁有豐富的細(xì)胞標(biāo)記經(jīng)驗(yàn)及基于FACS的細(xì)胞活力分析能力。
ADC結(jié)合能力測試
A: 將HER2 ADC (BB-1701和DS-8201) 與N87細(xì)胞共孵育，然后進(jìn)行FACS分析。B：將HER2蛋白固定在M5芯片上，將DS-8201梯度稀釋后注入芯片，通過Biacore 8K分析HER2和DS-8201的結(jié)合親和力。流式細(xì)胞術(shù)分析ADC與抗原表達(dá)細(xì)胞的結(jié)合能力（圖A：HER-2 ADC DS-8201、BB-1701與BT-474細(xì)胞結(jié)合能力測試）。 SPR分析ADC與抗原蛋白的結(jié)合能力（圖B：DS-8201與HER2蛋白結(jié)合測試）。 提供ELISA, HTRF等其它方法的結(jié)合能力測試。
ADC內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)OVCAR-3 細(xì)胞與 FITC 標(biāo)記的 ADC 孵育 24 小時(shí)，再與 Lyso-Tracker 和 DAPI 一起孵育，然后通過共聚焦顯微鏡進(jìn)行分析。美迪西可提供ADC熒光標(biāo)記服務(wù) (如ADC-FITC，ADC-Cy5等）。 利用共聚焦顯微鏡分析抗體內(nèi)吞（與溶酶體標(biāo)記lyso-tracker共染色分析內(nèi)吞部位）。 利用熒光Western或流式分析內(nèi)吞效率。
細(xì)胞毒性測試ADC, 裸抗及payload與靶細(xì)胞共孵育，通過CCK-8、CTG、MTT等方法測試各個(gè)待測物對腫瘤細(xì)胞的毒性。（圖：ADC,裸抗及payload對NCI-N87及HCT116細(xì)胞的生長抑制曲線）
細(xì)胞周期檢測MV-4-11細(xì)胞(人髓性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)和PC-3細(xì)胞(人前列腺癌細(xì)胞)用Compound A處理并用PI染色，進(jìn)行基于FACS的細(xì)胞周期分析。數(shù)據(jù)顯示Compound A顯著阻斷MV-4-11細(xì)胞周期，對PC-3細(xì)胞沒有太大影響。說明Compound A具有適應(yīng)癥特異性。
細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)MV-4-11細(xì)胞用Compound A處理并使用 PI/Annexin V染色，然后進(jìn)行 FACS 分析。數(shù)據(jù)顯示Compound A促進(jìn)MV-4-11細(xì)胞凋亡。 - ADC藥理學(xué)研究靶抗原結(jié)合活性 靶抗原相關(guān)藥理作用 (如:ADCC，CDC) 小分子化合物及活性代謝產(chǎn)物的作用機(jī)制(關(guān)注ADC與裸抗、游離小分子化合物或藥理活性代謝物之間的藥理作用差異，以及抗原表達(dá)水平對藥理作用的影響) 內(nèi)化、裝解以及裂解后主要的游離小分子化合物的效應(yīng)
- ADC 藥效學(xué)評價(jià)ADC的動(dòng)物體內(nèi)藥效試驗(yàn)是ADC研究中一項(xiàng)重要的藥理參數(shù)，它直接反映了ADC的功效并影響臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)。美迪西致力于為客戶提供成熟的評估ADC體內(nèi)藥效的腫瘤模型，在AAALAC認(rèn)證的環(huán)境下完成模型動(dòng)物的建模和飼養(yǎng)，并以GLP-like的高標(biāo)準(zhǔn)完成相關(guān)藥效學(xué)評價(jià)試驗(yàn)。目前美迪西已建立六大類近300種的腫瘤評價(jià)模型，能覆蓋大部分常規(guī)腫瘤疾病。 ADC藥物評價(jià)模型: 轉(zhuǎn)基因模型、異種腫瘤移植模型、同種腫瘤移植模型、PDX模型、人源化腫瘤移植模型、原位移植模型。 多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：嚙齒類（小鼠/大鼠、兔子）；非嚙齒類（比格犬、小型豬、非人靈長類動(dòng)物）。
通過MC-VC-PAB或PY-VC-PAB連接子使純化的人源化抗EGFR單克隆抗體(RC68）與MMAE偶聯(lián)生成RC68-MC-VC-PAB-MMAE和RC68-PY-VC-PAB-MMAE。RC68-MC-VC-PAB-MMAE和RC68-PY-VC-PAB-MMAE的體內(nèi)抗腫瘤活性檢測通過美迪西進(jìn)行。BALB/c裸鼠皮下移植H125細(xì)胞，當(dāng)腫瘤長到 100-300 mm3 時(shí)，將小鼠隨機(jī)分組并每周用指定藥物進(jìn)行靜脈給藥。通過測量腫瘤體積和小鼠體重從而衡量每種藥物對的影響。10 mg RC68-MC-VC-PAB-MMAE或RC68-PY-VC-PAB-MMAE 給藥處理后顯著抑制小鼠H125腫瘤的生長，且不影響小鼠體重。 - ADC 藥代動(dòng)力學(xué)評價(jià)由于ADC藥物組成成分復(fù)雜，其PK特性必須借助多個(gè)分析物的評估，因此增加了分析的難度。美迪西在ADC藥物的體內(nèi)分析中為各種ADC組分分析物提供了多種高質(zhì)量的測試方法，通過分析動(dòng)物體內(nèi)采集的血漿/血清樣本，為客戶提供可靠優(yōu)質(zhì)的PK數(shù)據(jù)。
待測物 描述 常用分析方法 Conjugated Antibody 至少偶聯(lián)一個(gè)藥物的抗體 LBA Total Antibody 全部偶聯(lián)、部分偶聯(lián)以及未偶聯(lián)的抗體 LBA Small Molecules 游離或被釋放的藥物小分子及其代謝物 LC-MS/MS ADA 可特異性結(jié)合ADC分子及其部分結(jié)構(gòu)的抗體 LBA 
藥代及毒代測試
ADA免疫原性的測定
開發(fā)優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的分析方法，最終能得到ADC和總抗體相關(guān)性很好的試驗(yàn)結(jié)果。
對標(biāo)國際實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，與美國實(shí)驗(yàn)室得出結(jié)論高度一致。
得益于先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的分析方法，不僅能夠?qū)?biāo)國際實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，得到與美國實(shí)驗(yàn)室結(jié)論高度一致的結(jié)果，而且最終能得到ADC和總抗體相關(guān)性很好的試驗(yàn)結(jié)果。免疫原性測試是生物藥的重要測定指標(biāo)，需在研究的各個(gè)階段全程把控。生物藥的免疫原性可能會(huì)導(dǎo)致ADC在體內(nèi)的快速清除，影響其PK特征和相關(guān)的分析。不僅如此，免疫原性可能還影響到ADC藥物的有效性和安全性。
為確保ADC藥物抗體篩選結(jié)果的精準(zhǔn)性和有效性，美迪西免疫原性研究四大平臺(tái)為抗體免疫原性的檢驗(yàn)提供了多種技術(shù)方案，最大程度滿足客戶的不同需求。美迪西免疫原性研究四大平臺(tái)：
ADC安全性評價(jià)
美迪西毒理研究部遵循ICH指導(dǎo)原則 S6和S9，結(jié)合每一個(gè)項(xiàng)目的具體情況定制個(gè)性化的安全性評價(jià)方案，提供符合NMPA、FDA、OECD、TGA等國際GLP標(biāo)準(zhǔn)的安全性評價(jià)服務(wù)，包括：
單次和重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)（伴隨毒代動(dòng)力學(xué)研究）；
安全藥理（包括組織交叉反應(yīng)）；
免疫原性檢測。
服務(wù)特點(diǎn)- 一站式整包服務(wù)所有研究均在同一園區(qū)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室有序完成，切實(shí)保證實(shí)驗(yàn)進(jìn)度和項(xiàng)目溝通的高效性，占據(jù)數(shù)據(jù)獲取和評估的行業(yè)優(yōu)越性。
- 數(shù)次成功的研究經(jīng)驗(yàn)ADC藥物組成相對復(fù)雜且目前尚無針對ADC 藥物的指導(dǎo)原則，所以從降低研發(fā)風(fēng)險(xiǎn)角度考慮，選擇有臨床前研究經(jīng)驗(yàn)的研發(fā)合作伙伴，就顯得尤為重要。
- 美迪西特色研究平臺(tái)蛋白質(zhì)/抗體藥代動(dòng)力學(xué)研究平臺(tái)生物技術(shù)藥物非人靈長類安全評價(jià)專業(yè)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)同位素藥物代學(xué)研究專業(yè)技術(shù)平臺(tái)
服務(wù)案例
