第一，在肝微粒體、肝細(xì)胞體外代謝模型中，孵育時(shí)間需設(shè)置合理，這個(gè)合理是基于人體肝微粒體或者肝細(xì)胞穩(wěn)定性的結(jié)果而設(shè)定的。如果體系孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，則可能引起代謝產(chǎn)物種類(lèi)和量偏少或偏多，這對(duì)最終判定一個(gè)代謝產(chǎn)物的比例或結(jié)果起絕對(duì)性的一個(gè)作用。

第二，在體外和體內(nèi)代謝產(chǎn)物鑒定試驗(yàn)中，如有紫外檢測(cè)器和質(zhì)譜檢測(cè)器數(shù)據(jù)，通常需要把兩者結(jié)合在一起分析，大部分情況下兩者的信號(hào)能夠匹配。但是紫外檢測(cè)器和質(zhì)譜檢測(cè)器的特點(diǎn)不同，質(zhì)譜檢測(cè)器相對(duì)而言靈敏度更高。而對(duì)一些含量相對(duì)比較低的代謝產(chǎn)物，紫外檢測(cè)器可能檢測(cè)不到。

第三，在代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)、母核類(lèi)似的情況下，代謝產(chǎn)物間的紫外強(qiáng)度數(shù)據(jù)可能比質(zhì)譜檢測(cè)數(shù)據(jù)更可靠。

對(duì)于創(chuàng)新化學(xué)藥相關(guān)動(dòng)物種屬選擇是基于目前現(xiàn)代色譜與與質(zhì)譜的分析方法，通過(guò)體外代謝模型來(lái)比較動(dòng)物種屬與人代謝的相似性來(lái)確定相關(guān)種屬，包括：分析代謝反應(yīng)類(lèi)型、代謝產(chǎn)物種類(lèi)以及量的差異。

體外的代謝體系常見(jiàn)的有：

● 肝微粒體代謝試驗(yàn)

● 肝細(xì)胞試驗(yàn)

● s9的實(shí)驗(yàn)

在肝微粒體中通常可以見(jiàn)到Ⅰ相代謝產(chǎn)物。

通過(guò)體外代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果同時(shí)結(jié)合早期動(dòng)物不同種屬體內(nèi)代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果來(lái)為綜合確定IND藥代安評(píng)最終種屬提供重要依據(jù)。

另外如果我們通過(guò)體外的代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果，進(jìn)入了正式的藥代安評(píng)體內(nèi)階段的話(huà)，我們可以采集藥代或毒代里面的一些樣品比如說(shuō)血漿或者說(shuō)排泄物去分析更復(fù)雜體內(nèi)環(huán)境代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生的情況。

通常是先開(kāi)展體外的代謝產(chǎn)物鑒定。比如說(shuō)通過(guò)肝微粒體體外代謝產(chǎn)物（Ⅰ相代謝產(chǎn)物）的鑒定結(jié)果和肝細(xì)胞中既含Ⅰ相又含Ⅱ相代謝產(chǎn)物的一個(gè)結(jié)果跟人的體外代謝產(chǎn)物去比較，如果非人種屬體外肝細(xì)胞或者肝微粒體的結(jié)果和人能夠較好匹配一致，那么我們從體外角度可以得到較為相關(guān)的嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)相關(guān)種屬；如果這兩個(gè)體外系統(tǒng)得出的結(jié)果一致性差異較大，比如說(shuō)肝微粒體傾向于猴，肝細(xì)胞傾向于犬，建議從體內(nèi)角度同時(shí)增加體內(nèi)代謝產(chǎn)物的鑒定結(jié)果來(lái)綜合判斷。

雖然常規(guī)的流程可能是先開(kāi)展體外的一個(gè)代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果，但是基于目前實(shí)驗(yàn)條件以及可行性方面的考慮同時(shí)去開(kāi)展體內(nèi)的各個(gè)種屬的代謝產(chǎn)物鑒定其實(shí)不是難事，那么我們可以得到更為可靠的數(shù)據(jù)，繼續(xù)往前推進(jìn)。

有時(shí)在體外代產(chǎn)物問(wèn)題結(jié)果不太確定的情況下強(qiáng)烈建議大家再往前進(jìn)一步去拿到體內(nèi)的一個(gè)體內(nèi)的代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果去比較。

如果體內(nèi)的代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果與體外的人的一個(gè)代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果能夠匹配的話(huà)，我們可以就確定較為相關(guān)的嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)相關(guān)種屬。

如果體內(nèi)代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果與體外人的一個(gè)代謝產(chǎn)物鑒定結(jié)果不是特別匹配，那么在這種情況下我們通常選擇與人最近的嚙齒類(lèi)和非嚙齒類(lèi)種屬。

在綜合分析數(shù)據(jù)的情況下，在臨床前階段，通常只有肝微粒體或者肝細(xì)胞的MetID數(shù)據(jù)，在僅有的數(shù)據(jù)前提下同時(shí)結(jié)合動(dòng)物體內(nèi)的MetID去匹配體外人的MetID結(jié)果，為毒理種屬選擇提供重要的依據(jù)。

對(duì)于這個(gè)問(wèn)題并不是只要產(chǎn)生代謝產(chǎn)物就一定要對(duì)其進(jìn)行監(jiān)測(cè)，還存在一個(gè)量方面的考慮,所以 FDA MIST 和ICH M3(R2)里有指導(dǎo)只有在人體代謝產(chǎn)物的暴露量超過(guò)藥物相關(guān)總暴露量的10%，且在人體中暴露量水平明顯高于毒理學(xué)試驗(yàn)中動(dòng)物最大暴露量時(shí)，才需要對(duì)該代謝產(chǎn)物進(jìn)行非臨床評(píng)價(jià)以支持Ⅲ期臨床試驗(yàn)。

但通常我們的實(shí)際情況是非臨床階段沒(méi)有臨床人體代謝產(chǎn)物相關(guān)的數(shù)據(jù)，最終這就是一個(gè)對(duì)比。

動(dòng)物體內(nèi)代代謝產(chǎn)物暴露量與人體代謝產(chǎn)物暴露量的情況，按照排列組合通常會(huì)有以下 4 種情況出現(xiàn)：

（1）、代謝產(chǎn)物里邊在人體是特有的，動(dòng)物里面沒(méi)有

（2）、人體有但含量比較低，在動(dòng)物體內(nèi)含量相對(duì)比較高

（3）、動(dòng)物里特有，人體里沒(méi)有

（4）、人體里代謝產(chǎn)物含量相對(duì)比較高，動(dòng)物體內(nèi)相對(duì)比較低。