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首頁研發(fā)服務(wù)藥物發(fā)現(xiàn)生物學(xué)結(jié)構(gòu)生物學(xué)蛋白表達(dá)與純化平臺酵母菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)

酵母菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)

酵母表達(dá)系統(tǒng)兼有原核和高等真核系統(tǒng)的優(yōu)點，具備培養(yǎng)條件普通、生長速度快、成本相對較低、能進(jìn)行蛋白翻譯后加工、易獲得可溶性活性重組蛋白等特點，被廣泛用于重組蛋白尤其是真核蛋白的生產(chǎn)制備。其中巴斯德畢赤酵母（Pichia pastoris）因其生長速度快、商業(yè)化表達(dá)載體豐富、可獲得高效的分泌表達(dá)等優(yōu)點，使其成為酵母表達(dá)重組蛋白的優(yōu)先選擇。

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服務(wù)項目

美迪西科研人員建立了成熟的酵母表達(dá)純化服務(wù)平臺，提供優(yōu)質(zhì)的重組蛋白在畢赤酵母中的表達(dá)與純化服務(wù)。

酵母表達(dá)系統(tǒng)服務(wù)項目:
重組酵母表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建；重組質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化；重組表達(dá)子篩選；小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化（2L培養(yǎng)基培養(yǎng)產(chǎn)物）；大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化（10L以上）。

項目步驟

步驟	實驗內(nèi)容	實驗時間	備注
1	重組酵母表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建	2 周	可選擇不同載體；不同親和標(biāo)簽；分泌或胞內(nèi)表達(dá)
2	重組質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化	1周	不同表達(dá)菌株可選， PCR 鑒定5-10個克隆
3	重組表達(dá)子篩選	3-4周	5-10個克隆篩選， Zeocin抗生素濃度篩選重組子，結(jié)合Western blot 方法鑒定重組蛋白表達(dá)
4	小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化	2-4周	優(yōu)化培養(yǎng)基，菌體密度，甲醇濃度，誘導(dǎo)時間等
5	大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化	根據(jù)表達(dá)體積商定	可選擇搖瓶或者發(fā)酵罐培養(yǎng)